IVF (In-Vitro Fertilizacija) je metoda pomoću koje se na dobijenim jajnim ćelijama žene vrši oplodnja spermatozoidima u strogo kontrolisanim laboratorijskim uslovima. Oplodnja jajnih ćelija se može vršiti na dva načina:
Klasičnom IVF metodom
Klasična IVF metoda oponaša prirodne uslove tako što se u sudu gdje se nalaze jajne ćelije dodaje određen broj aktivno pokretnih spermatozoida dobijenih obradom ejakulata – sperme (prečišćenog od nepokretnih i slabo pokretnih spermatozoida, ćelijskog otpada, leukocita i drugih štetnih materija). Ovako spremljen sud se odlaže u inkubator do sledećeg dana. Za to vrijeme spermatozoidi nastavljaju svoje kretanje i probijaju slojeve manjih pomoćnih ćelija da bi došli do zaštitne opne same jajne ćelije (oocite). Prvi kompetentan spermatozoid biva izabran od strane jajne ćelije kojoj predaje genetski materijal oca. Naredni dan ćelije i spermatozoidi u spremljenom sudu se iznose iz inkubatora i pravilno oplođene ćelije se odvajaju od neoplođenih i tako vraćaju u inkubator na dalje kultivisanje. Geni od oba roditelja su sada prisutni u jajnoj ćeliji koja se na ovom stadijumu naziva zigot i ona je spremna da nastavi svoj razvoj i podijeli se ćelijskom diobom.
Indikacije za upotrebu klasične IVF metode su slučajevi kada spermogram muškarca zadovoljava kriterijume normalnog nalaza, kada se ne sumnja na ozbiljno snižen kvalitet jajnih ćelija žene, kod žena kojima je neplodnost uzrokovana neprohodnim jajovodima, kod žena sa neobjašnjenim sterilitetom (idiopatski sterilitet) u mlađim reproduktivnim godinama, kod parova koji po prvi put ulaze u proces vantjelesne oplodnje sa tim da muški partner ima dobar nalaz spermograma…
ICSI metodom (intracitoplazmatsko injektovanje spermatozoida)
ICSI (intracitoplazmatsko injektovanje spermatozoida) je metoda kod koje embriolog pod mikroskopom uz pomoć mikropipeta pojedinačno vrši izbor jednog po jednog spermatozoida, vodeći računa da je izabrani spermatozoid približno što više normalnan. Odabranog spermatozoida usisava u mikropipetu (ICSI mikropipeta) i potom drugom mikropipetom (holding mikropipeta) pridržava jajnu ćeliju u čiju unutrašnjost ispušta jedan spermatozoid i potom izlazi iz nje. Ovim postpukom je završen ICSI jedne jajne ćelije. Postupak se ponavlja na svim zrelim ćelijama. Ovako spojene ćelije sa spermatozoidima se stavljaju u inkubator za uzgajanje. Sledeći dan nakon ICSI-ja vrši se provjera oplodnje (fertilizacije) pa se pravilno oplođene ćelije odvajaju od neoplođenih i tako vraćaju u inkubator na dalje kultivisanje.
Indikacije za ICSI su nalaz spermograma čiji su parametri ispod normalnih vrijednosti (u pogledu brojnosti, pokretljivosti, morfologije), kada su spermatozoidi dobijeni hirurškim putem pomoću biopsije testisa ili punkcije epididimisa, izostanak oplodnje ili slaba oplodnja kod prethodnih ciklusa vantjelesne oplodnje gdje se koristila klasična IVF metoda, kod odmrznutih jajnih ćelija, kod kasne reproduktivne dobi pacijentkinje i malog broja dobijenih jajnih ćelija gde se sumnja na TFF, kod pacijentkinja sa prethodnim izostankom oplodnje u IVF ciklusu, prisustva stanja koja bitno negativno utiču na kvalitet jajnih ćelija.
Klasična IVF metoda i ICSI se mogu koristiti kombinovano pa se tako određen broj ćelija inseminira jednom a ostatak drugom metodom.
Pronalazak ICSI metode je jedno od najvećih dostignuća na polju vantjelesne oplodnje jer je tako omogućena i šansa za roditeljstvo kod parova gdje se radi o ozbiljnom obliku muškog steriliteta sa jako umanjenim ili samo par pronađenih spermatozoida što sa klasičnom IVF metodom nije moguće.
Šta možemo da očekujemo?
Nijesu sve dobijene jajne ćelije spremne da budu oplođene, tako je prosječno 75-90% dobijenih ćelija u jednom ciklusu spremno za dalji proces vantjelesne oplodnje. Ćelije koje su kompetentne za dalji rad se nazivaju zrelim. Samo na zrelim ćelijama se pomoću ICSI i IVF metode može očekivati oplodnja. Ćelije koje su nezrele mogu u samom procesu da sazriju i na njima bude rađen ICSI ali takve ćelije imaju manji potencijal da budu oplođene od inicijalno zrelih jajnih ćelija. Procenat oplođenih jajnih ćelija od zrelih ćelija na kojima je upotrebljena jedna od dvije gore opisane metode prosječno iznosi 70% i više. Oplodnja može da bitno varira u odnosu na godine žene, kvalitet jajnih ćelija, kvalitet spermatozoida, razlog infertiliteta, od ovarijalne stimulacije, stručnosti embriologa u rukovanju jajnim ćelijama i mnogih drugih faktora. Procenat oplođenih jajnih ćelija upotrebom IVF metode je identičan ili vrlo blago manji kao sa ICSI metodom kod slučajeva sa normalnim spermogramom dok je ICSI metoda obavezna kod slučajeva ozbiljnog muškog steriliteta.